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来源:未知   作者:不详   发布时间:2023-05-05 10:48   点击:374次
摘要:血浆凝固酶试验注意事项玻片法:10 秒内观察结果,如超过10 秒可出现假阳性,因此必须用试管法验证凝聚因子试验。血浆凝固酶试验方法玻片法:在1张洁净玻片中央加1滴9g/L氯化钠
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果纳芬不要求冷藏,在零下3度冬天的室内温度也是比较适合果纳芬储存的,因为果纳芬只要储存在2到25度的环境中就可以。不过需要注意的是,要放在阴凉干燥的地方,避免被阳光直射。而放在冰箱冷藏的季节大多是在夏天,夏天温度过高会使药物内的蛋白质分解,从而产生出对人体有害的物质,而冬天的室内是可以常温储存的。

果纳芬是一种比较常规的促排药物,一般适用于卵巢功能不是很好的女性。而果纳芬注射时间和存储时间一定要严格按照医嘱来进行。下面是果纳芬的具体储藏要求:

1.未开封的果纳芬注射笔需要在2-8℃的温度冷藏,不能冷冻保存,冷冻后药物是不能使用的;

2.开封后的果纳芬注射笔需要在25℃以下避光保存,开封后最多能够放28天,超过28天就要丢弃,不可以继续使用;

3.正常的果纳芬注射笔内的药液澄清透明,若出现浑浊、沉淀就不能使用。

在山东大学齐鲁医院做试管婴儿可以养囊,但不是必须养囊。每位患者的身体状况不同,所实行的试管方案是有差异的,目前该院的试管移植方式有鲜胚移植、冻胚移植和囊胚移植等方式,医生会根据患者的具体情况制定合适的方案,虽然养囊后进行囊胚移植的成功率要高一些,但不是所有的患者都适合样养囊,也不是所有患者都需要养囊。

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山东大学齐鲁医院在1999年成立生殖医学中心,发展到现在已经帮助广大不孕不育患者实现了生孩子的愿望。目前齐鲁医院试管婴儿成功率在50%左右,其中囊胚移植的成功率也可以达到50%左右。因此山东大学齐鲁医院有很大一部分的患者都会选择养囊。不过移植成功率高不代表所有的患都需要养囊,下面是需要养囊的患者情况分析:

1.35岁以下的年轻女性,卵巢储备良好,有超过5个优质胚胎,可以选择养囊;

2.多次胚胎移植失败的患者,可以通过养囊筛选胚胎,提高囊胚移植的机会;

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3.需要做胚胎植入前,胚胎遗传学诊断的患者;

4.宫腔或是身体需要调理的,暂时不能移植却又想进行新鲜胚胎移植的患者,可以考虑养囊。

血浆凝固酶试验原理

病原性葡萄球菌能产生血浆凝固酶,使血浆中纤维蛋白原变为不溶性纤维蛋白,附于细菌表面,生成凝块,因而具有抗吞噬的作用。凝固酶试验对于判定该菌株是否具有致病力,很有帮助。葡萄球菌凝固酶试验被广泛地用于常规鉴定金黄色葡萄球菌与其他葡萄球菌。

葡萄球菌所产生的凝固酶有以下两种:

结合凝固酶(即凝聚因子):是一种结合于菌体细胞壁的酶,它直接作用于血浆中纤维蛋白原,使之变成纤维蛋白,而使葡萄球菌凝集成块,玻片法阳性结果是由此酶(凝聚因子)所致。

游离凝固酶:是凝血酶原样物质,不直接作用于血浆纤维蛋白原上,而被血浆中的致活剂(即凝固酶致活因子)激活后,变成耐热的凝血酶样物质,此物质可使血浆中的液态纤维蛋白原变为固态纤维蛋白,从而使血浆凝固。试管法的阳性结果为此酶所致。

血浆凝固酶试验方法

玻片法:

在1张洁净玻片中央加1滴9g/L氯化钠(生理盐水)溶液,用接种环取待检培养物与其混合(设阳性和阴性对照) 制成菌悬液,若经10~20s 内无自凝现象发生,则加入兔新鲜血浆1环,与菌悬液混合,观察结果。5~10s内出现凝集者为阳性。

试管法:

用生理盐水将新鲜兔血浆4倍稀释,取0.5 ml于试管再加0.5ml待测菌浓菌悬液(需做阳性对照及阴性对照。),混匀后置37℃水浴中,每30min观察1次结果。若3小时内试验管和阳性对照管出现凝固,阴性对照管(即浓菌液管)不凝固,为阳性;若阴性,继续观察到24小时,不凝固者为阴性。如有凝块或整管凝集出现为阳性。4h后无上述现象出现,则放置过夜后再观察。

(商品化)冻干血浆法:

每支西林瓶加入0.5mL灭菌生理盐水至完全溶解,然后加入葡萄球菌24h肉汤培养物0.3mL,充分混匀, 盖好西林瓶胶塞,置于36±1℃培养,在6h内定时观察结果。结果观察(如下图所示):倾斜或倒置试管时,呈现凝固块,或凝固块体积大于原体积的一半时,为血浆凝固酶阳性。观察结果时应避免用力振动西林瓶,以免凝块振碎。

血凝固酶实验

血浆凝固酶试验应用:

本试验仅用于致病性葡萄球菌的鉴定。

血浆凝固酶试验注意事项

玻片法:

10 秒内观察结果,如超过10 秒可出现假阳性,因此必须用试管法验证凝聚因子试验。 可选择的玻片凝集试验法还包括检测凝集因子和蛋白A的胶乳凝集试验。但胶乳凝集试验和玻片凝固酶试验的结果并不完全一致。

尽管胶乳凝集试验鉴定路邓葡萄球菌(Staphylococcus lugdunensis)的可靠性较差,但鉴定金黄色葡萄球菌的特异性和灵敏性均高于传统的玻片凝固酶试验。有些腐生葡萄球菌和松鼠葡萄球菌及某些微球菌属的菌种可能胶乳凝集试验阳性,但玻片凝固酶试验通常阴性。

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a. 试管法葡萄球菌凝固酶试验阳性者,应见到明显的纤维蛋白凝胶块,出现羊毛状或纤维状沉淀物并非真正凝固,应判为阴性。中间型葡萄球菌、猪葡萄球菌需要较长时间(4H以上)孵育,才可出现阳性。

b. 如果培养时间超过4H,应考虑以下几点:

Ⅰ.延长培养时间后,有些菌株产生的葡萄球菌激酶(溶纤维蛋白酶),可以裂解凝块,产生假阴性结果;

Ⅱ.如果使用的血浆不是无菌的(或部分不是无菌的),假阳性和假阴性结果均有可能发生;

Ⅲ.所用待测菌不纯,延长培养时间后,污染菌可能导致假阳性结果。在这点上,含EDTA的血浆优于柠檬酸盐血浆,因为利用柠檬酸盐的细菌(如一些链球菌)可能通过消耗柠檬酸盐促进凝集发生。

Ⅳ.所用血浆缺乏纤维蛋白原(脱纤维血浆)。

试管法:

须制备浓厚的均匀菌悬液,以便观察结果。

最好用EDTA 抗凝的兔血浆,不主张用人的抗凝血,除非经过试验证实其中不含感染因子、没有凝血能力和没有抑制因子。不同种动物血浆因子不同,凝固状态也不同,兔血浆凝块结实,凝固速度快,优于人血浆。

试验不可在高盐培养基上的取菌落,因为可能出现自凝或假阳性。

若被检菌为陈旧的肉汤培养物(超过18~24H),或生长不良,凝固酶活性低的菌株可能检测不出来。

为防止玻片法检测的假阳性反应,必须严格按《全国临床检验操作规程》进行操作。当怀疑待测菌是金黄色葡萄球菌时,对玻片凝固酶阴性的结果应做试管法凝固酶试验确证。玻片法和试管法凝固酶试验的血浆标准是:必须含有足够浓度的凝固酶反应因子和纤维蛋白原,必须无溶纤维蛋白活性和无抑制剂。

本试验应同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性的葡萄球菌的肉汤培养物作为对照。

商品化冻干血浆试剂需按照厂家提供的产品说明书使用及结果判读。

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